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安全是实验前提 规范操作是实验基础

发布时间:2021-3-12 18:55:51??????点击:

  離心機在植物組織蛋白質提取中的應用講解.

  本文講解的提取方法是采用三氯醋酸—丙酮沈澱法,詳細步驟如下:

  1、在液氮中研磨葉片

  2、加入樣品體積3倍的提取液在-20℃的條件下過夜,然後離心機離心(4℃8000rpm以上1小時)棄上清。

  3、加入等體積的冰浴丙酮(含0.07%的β-巯基乙醇),搖勻後離心機離心(4℃8000rpm以上1小時),然後真空幹燥沈澱,備用。

  4、上樣前加入裂解液,室溫放置30分鍾,使蛋白充分溶于裂解液中,然後離心機離心(15℃8000rpm以上1小時或更長時間以沒有沈澱爲標准),可臨時保存在4℃待用。

  5、用Brandford法定量蛋白,然後可分裝放入-80℃備用。

  藥品:

  提取液:含10%TCA和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮

  裂解液:2.7g尿素0.2gCHAPS溶于3ml滅菌的去離子水中(終體積爲5ml),使用前再加入1M的DTT65ul/ml。

  這種方法針對雙向電泳,雜質少,離子濃度小的特點!當然單向電泳也同樣適用,只是電泳的條帶會減少!

  注意在離心機的使用過程中,都必須遵循一些安全要求:

  转鼓的强度计算应符合JB/T 8105使用范围所界定的规定,其结构及各零、部件,必须有足够的强度、刚度和稳定性。

  應保證在規定的工作條件下,運行安全可靠,並且操作維護方便,在操作人員遵守操作規程的條件下,安全防護裝置應確保人身的安全。

  在按規定條件制造、安裝、貯運和使用時,不得對人身安全構成威脅和造成傷害。

  離心機密閉防爆要求

  1)處于密閉、易燃、易爆環境或潮濕環境下工作的離心機,應符合密閉、防燃、防爆、防濕等有關標准或法規的要求。

  2)處于密閉、易燃、易爆環境或潮濕環境下工作的離心機,應有可靠的安全防護措施。

  上海盧湘儀離心機儀器有限公司作为经验丰富的离心机厂家,在设计制造离心机以及培训使用离心机的时候,严格按照以上要求执行!


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