搜索???Search
聯系我們???Contact
你的位置:首頁 > 新聞動態 > 行業新聞

它是原生質體制備提取實驗老搭档

发布时间:2021-11-24 18:34:13??????点击:

  原生質體制備提取實驗不能缺少老搭檔——離心機,它可以說是原生質體制備提取實驗必備儀器了。

  原生質體制備提取作用有五點:

  1.細胞融合。

  2.原生質體中進行瞬時表達:亞細胞定位,蛋白和核酸相互作用。

  3.利用膜片鉗技術研究離子通道及原生質體在受光、脅迫和激素作用後的調節機制的研究。

  4.細胞壁再生、細胞分裂與分化、攝入細胞器、病毒侵染機理、膜透性及離子轉運等基礎理論研究的理想材料。

  5.被用來作爲研究植物細胞鈣信號轉導及其調節機制的理想材料。

  由此可見原生質體純化的重要性。下面以植物爲例,進行簡單講解:

  纖維素酶和果膠酶能分解植物細胞壁,形成原生質體;加入0.6mol/l甘露醇的目的是維持原生質體正常的形態,防止原生質體吸水脹破;不同植物細胞結構不同,則原生質體結構不同;原生質體的結構由細胞膜、細胞質和細胞核組成。

  将酶解后的组织液过尼龙网膜,去除未充分消化的组织碎片,选择与原生质体等渗的buffer清洗原生质体两次,离心去除碎片(一般采取50-100 g,離心機离心1-2 min左右),最后将原生质体重悬于适当浓度甘露醇中。可参考以下方法来降低原生质体悬液中的碎片占比:

  1. 提前优化样本,比如剥去外皮(仅限于研究对象不包含外皮部分的样本)、弃去质地坚硬的组织和损伤组织。

  2. 降低離心機离心转速和时间,去除留在上清中的碎片。

  3. 如果原生质体起始量足够大,可考虑通过流式分选去除碎片。

  以上就是关于離心機在原生质体制备提取实验中的应用,如果您还想了解更多有关離心機的信息,可以多多关注上海盧湘儀離心機儀器有限公司。


48.3K
客服胡经理
客服余经理
客服徐经理
網頁在線咨詢